定大米中嘧啶色谱速测气相甲基法快磷残留量

我国是气相大米消费大国，甲基嘧啶磷是色谱速测杀虫、杀螨剂，法快广泛用于谷物保护剂，米中嘧啶对害虫具有触杀作用，甲基杀虫速度快，磷残留量持效期长，气相GB2763-2016《食品安全国家标准食品中农药最大残留限量》和原国家食药总局发布的色谱速测《2018版国家食品安全监督抽检实施细则》都规定了大米中甲基嘧啶磷残留量用GB/T5009.145-2003《植物性食品中有机磷和氨基甲酸酯类农药多种残留的测定》标准方法检测，方法已有近20年了，法快随着科技的米中嘧啶不断进步，检测方法没有得到相应的甲基研究和发展，GB/T5009.145—2003标准规定使用NPD检测器，磷残留量NPD检测器重现差比较差，气相受氢气流量和铷珠电压影响很大，色谱速测铷珠又是法快耗材，随着时间的推移，铷珠的灵敏度也跟着下降，安捷伦的铷珠正常寿命在1年左右，标准规定的前期也比较繁琐，加标回收率也比较低；大多数的检验机构不再使用NPD检测器了，笔者在实验中利用安捷伦FPD检测器，不仅检测结果重现性好，而且样品前期处理简单，不会影响仪器的使用寿命，样品直接用丙酮溶解，过滤，浓缩（ 在50℃水浴锅上，甲基嘧啶磷沸点约330℃），用气相专用小柱净化，干扰物质少，是定量检测大米中甲基嘧啶磷残留量的理想方法。

一、材料与方法

1、仪器与试剂
两台安捷伦7890B气相色谱仪（ 1台配有FPD检测器、磷滤光片，另1台NPD检测器）；7693液体自动进样器和150位进样盘。

丙酮（ 色谱纯，甲基嘧啶磷标样浓度100μg/mL，不确定度3%）：北京坛墨质检科技有限公司；上海安谱实验科技有限公司的有机相相针式滤器（ 尼龙），100只/罐，13mm，0.22μm。

2、色谱条件

（1）色谱条件一

色谱柱：DB-1701毛细管柱（ 30mx0.32mmx0.25μm）；检测器300℃（NPD检测器），进样口室度：240℃，柱温箱：80℃保持lmin，10℃/min升温至240℃保持10min；后运行250℃载气：高纯氮；柱流速：0.8mL/min。进样模式：不分流进样。进样量：1μL。

（2）色谱条件二

色谱柱：DB-1701毛细管柱（ 30mx0.32mmx0.25μm）；检测器260℃（FPD检测器），进样口室度：220℃，柱温箱：100℃保持0min，10℃/min升温至220℃保持14min；后运行250℃，载气：高纯氮；柱流速：0.8mL/min。进样模式：不分流进样。进样量：1μL。

3、标准曲线

（1）准确移取标准溶液0.01、0.02、0.04、0.8、1mL于10mL的容量瓶中，以丙酮稀释定容，配成标准溶液浓度为0.1、0.1、0.4、0.8、1μg/mL，现用现配，绘制甲基嘧啶磷标准曲线。

4、试样制备及测定

（1）GB/T5009.145-2003标准规定的样品提取方法是：称取20g（精确至0.01g）样品于三角瓶中，加入5g无水硫酸钠和100mL丙酮，振荡提取30min，过滤后取50mL滤液于分液漏斗中；净化：向分液漏斗中加入50mL5%氯化钠溶液，再以50mL、50mL、30mL二氯甲烷提取三次，合并二氯甲烷层经无水硫酸钠过滤后，在旋转蒸发仪40℃水浴上浓缩近干，定容至1mL，待测。标准方法前期处理比较繁琐，需要大量的有机试剂，不仅浪费，而且会污染环境，二氯甲烷溶液是一种具有一定的毒性，对人体有一定的危害，美国将其列入可疑致癌物，因而采用下列提取方法。

（2）准确称取混合混匀样品20g（ 精确至0.01g）于250mL三角瓶中，加入100mL丙酮，振荡提取30min，样液过滤于蒸发皿中，在50℃水浴锅上浓缩近干，用丙酮定容至lmL，用0.22μm气相滤头过滤于进样瓶中，待测。同时做空白试验，样品的提取在通风橱中进行。

在试验条件下，FPD检测器样品和标准品的色谱图见图1、2。

NPD检测器中，0.1μg/mL甲基嘧啶磷标准溶液出峰太小，0.5μg/mL甲基嘧啶磷标准溶液峰面积才40左右，仪器灵敏度不如FPD。

NPD检测器中，0.1μg/mL甲基嘧啶磷标准溶液出峰太小，基本忽略不计，0.5pug/mL甲基嘧啶磷标准溶液峰面积才40左右，仪器灵敏度不如FPD，在FPD检测器中，0.1μg/mL甲基嘧啶磷在20g大米中检测结果约为0.005mg/kg，在NPD检测器中却是未检出。安捷伦公司的反馈，购买安捷伦气相色谱检测有机磷的，使用FPD检测器的比NPD检测器的要多的多，FPD检测器具有更大的优势。

二、结果与讨论

1、检测器及柱箱程序升温的选择从上面可以得出：FPD相对于NPD，对有机磷检验具有明显的优势，不需要更换耗材（ 铷珠，普通的都一万多元），灵敏度高，重现性高，对环境影响小。利用正交试验法对色谱柱、进样口、检测器温度进行优化设计，找出最佳温度和程序升温时间。即：FPD检测器260℃，进样口室度：220℃，柱温箱：100℃保持0min，10℃/min升温至220℃保持14min；后运行250℃，载气：高纯氮；柱流速：0.8mL/min。进样模式：不分流进样。进样量：1μL。

2、色谱柱的选择

实验室常用的非极性、弱极性、中等极性、极性柱进行试验。根据待测物的性质，以及参考相关文献，最终选择DB-1701毛细管柱（ 30mx0.32mx0.25μm），分离效果最理想。样品中检测出甲基嘧啶磷物质，还需用中等极性DB-1毛细管柱（ 30mx0.53mmx1.50ym）进行确认。

3、标准曲线、精密度和检出限

按试验方法测定标准使用液系列，5～50μg/kg范围内呈线性，利用安捷伦7890B气相色谱仪工作站中的校正表得出线性回归方程为Y=306.57526X+1.21031，相关系数r=0.99937。

0.1μg/mL甲基嘧啶磷标准谱图中，工作站得出的信号噪声比为16.8，逐级稀释0.1μg/mL甲基嘧啶磷标准浓度至0.02μg/mL时，工作站得出的信号噪声比为3.4，即0.02ug/mL是甲基嘧啶磷的最低检测浓度，此时计算在20g大米中进样量1μL时甲基嘧啶磷检测限（ 3S/N）为0.02÷20=lμg/kg。取市场上检测出甲基嘧啶磷的大米10份，准确称取混合混匀样品20g（ 精确至0.01g）于250mL三角瓶中，加入100mL丙酮，振荡提取30min，样液过滤于蒸发皿中，在50℃水浴锅上浓缩近干，用丙酮定容至lmL，用0.22μm气相滤头过滤于进样瓶中，待测。同时做空白试验，样品的提取在通风橱中进行。做精密度试验，测出甲基嘧啶磷的相对标准偏差RSD为3.26%。

4、方法的回收率

准确称大米（ 2.3）20g共3份于250mL三角瓶中，迅速加入0.1、0.2、0.5mL甲基嘧啶磷标样（ 1μg/mL）。按以下两种方法进行分析：（1）GB/T5009.145-2003标准规定的样品提取方法是：称取20g（精确至0.01g）样品于三角瓶中，加入5g无水硫酸钠和100mL丙酮，振荡提取30min，过滤后取50mL滤液于分液漏斗中；净化：向分液漏斗中加入50mL5%氯化钠溶液，再以50mL、50mL、30mL二氯甲烷提取三次，合并二氯甲烷层经无水硫酸钠过滤后，在旋转蒸发仪40℃水浴上浓缩近干，定容至1mL，待测。标准方法前期处理比较繁琐，需要大量的有机试剂，不仅浪费，而且会污染环境，二氯甲烷溶液是一种具有一定的毒性，对人体有一定的危害，美国将其列入可疑致癌物，因而采用下列提取方法。

（2）准确称取混合混匀样品20g（ 精确至0.01g）于250mL三角瓶中，加入100mL丙酮，振荡提取30min，样液过滤于蒸发皿中，在50℃水浴锅上浓缩近干，用丙酮定容至lmL，用0.22μm气相滤头过滤于进样瓶中，待测。同时做空白试验，样品的提取在通风橱中进行。平行测定3次，被测样品加标回收率在86.79%～93.5%，测定结果准确可靠。

三、结论

采用该方法对大米中甲基嘧啶磷残留量进行测定，方法采用外标法，前处理简单，有机试剂用的少，干扰组分少，环境污染小，分析时间短。通过对样品的加标回收和样品中目标物质的反复多次验证，测试结果表明，该方法精密度和准确度高，灵敏度好，觖决了NPD检测器的缺点，非常适合批量大米中甲基嘧啶磷残留量的快速定量检测。

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